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通用細(xì)胞凍存液的操作注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2019-04-25   點(diǎn)擊次數(shù):2295次

  細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中,及時(shí)凍存原始細(xì)胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中,雜交瘤細(xì)胞、每次克隆化得到的亞克隆細(xì)胞的凍存保種常常是*的實(shí)驗(yàn)操作。因?yàn)樵跊]有建立一個(gè)穩(wěn)定的細(xì)胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞系的時(shí)候,細(xì)胞的培養(yǎng)過程中隨時(shí)可能因細(xì)胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等等導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗,如果沒有原始細(xì)胞的凍存,則因?yàn)樯鲜龅囊馔舛肮ΡM棄。

   通用細(xì)胞凍存液以進(jìn)口FBS、DMSO為主要原材料配制,適用于是各種哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞,傳代細(xì)胞系和雜交瘤細(xì)胞等的凍存保種。本產(chǎn)品為即用型試劑,儲(chǔ)存穩(wěn)定,使用方便,細(xì)胞存活率高。
本產(chǎn)品的使用方法同其他細(xì)胞凍存液基本一致,原則上細(xì)胞每支安瓿含1-10×106/ml。
消化到位的貼壁細(xì)胞,或后一次離心后棄掉上清液,加入細(xì)胞凍存液,重懸、吹散沉淀的細(xì)胞,分裝入細(xì)胞凍存管,密封標(biāo)記后按常規(guī)操作流程依次經(jīng)4℃,-20℃,-80℃直至液氮罐或用程序降溫儀逐級(jí)降溫凍存。

注意事項(xiàng):

1.取用凍存液均要在超凈工作臺(tái)內(nèi)無菌操作 。
 

2.初次使用融化后可在2-8℃避光保存至少1個(gè)月,少量蛋白析出不影響凍存效果。
 

3.凍存時(shí)從室溫可快速降到0℃,再降溫時(shí)一般按每分鐘降溫1~2℃,待降至-70℃以下時(shí)可放入液氮中,在液氮中細(xì)胞可保存數(shù)年或更長(zhǎng)時(shí)間。

4.凍存的雜交瘤細(xì)胞要定期復(fù)蘇,檢查細(xì)胞的活性和分泌抗體穩(wěn)
                                                         

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