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組織甘油三脂檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介
更新時(shí)間:2019-01-18   點(diǎn)擊次數(shù):1405次

組織甘油三脂檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 

描述:

甘油三酯是由甘油和脂肪酸酯化而成,是血脂的主要成分,也是機(jī)體重要的供能物質(zhì)。高甘油三酯和高膽固醇血癥是常見的高脂血癥,與許多疾病相關(guān)。與血漿甘油三酯測(cè)定相比,實(shí)體組織和細(xì)胞的甘油三酯測(cè)定并非易事。本試劑盒避免了有毒的lv仿甲醇提取、繁雜的氮?dú)獯蹈珊椭|(zhì)復(fù)溶等步驟,采用能試劑進(jìn)行組織細(xì)胞裂解和甘油三酯抽提,而且優(yōu)化了GPO Trinder酶學(xué)反應(yīng)組分和操作步驟。簡(jiǎn)單易行、靈敏度高檢測(cè)范圍為 20-2000µmol/L。可用于測(cè)量動(dòng)植物組織細(xì)胞、固態(tài)食品材料、高濃度油料樣品中的甘油三酯含量。

 

原理:

(1)脂肪酶分解血清中的甘油三酯為甘油;

(2)甘油激酶將甘油化為3-甘油;

(3)3-甘油被甘油氧化酶氧化產(chǎn)生過氧化氫;在過氧化物酶作用下生色底物轉(zhuǎn)化為苯醌亞胺,其光密度值與甘油濃度成正比。

 

操作步驟:

一 組織細(xì)胞裂解:
   在裂解前,組織或者細(xì)胞用PBS洗滌兩次以去除甘油
1. 原代脂肪細(xì)胞:200g,5分鐘離心收集細(xì)胞。建議每100 µl壓積(Packed Cell Volume)脂肪細(xì)胞加入1ml裂解液,震蕩裂解,而后室溫靜置10分鐘。
2. 分化脂肪細(xì)胞或非脂肪細(xì)胞:可先用胰酶消化、離心收集細(xì)胞而后進(jìn)行裂解,也可直接在培養(yǎng)皿內(nèi)進(jìn)行裂解。通常情況下,可按比例每1x106 個(gè)細(xì)胞加入0.1ml裂解液,混勻后室溫靜置10分鐘。
3. 動(dòng)物組織:離心管稱重,加入組織塊后再稱重,二者相減(即減量稱重法)計(jì)算組織重量(約50mg)。強(qiáng)烈建議按比例每1mg組織加20µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質(zhì)含量變異而產(chǎn)生的誤差。強(qiáng)烈建議裂解液用量在1ml左右,保證有效的勻漿裂解與脂質(zhì)提取。用電動(dòng)高速勻漿器或手動(dòng)玻璃勻漿器破碎組織。(不推薦超聲方法,因其不能*和均勻破碎。應(yīng)根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)調(diào)整初始的組織細(xì)胞加入量),勻漿后靜置10分鐘。
4. 植物油料種子、食品、含高油量樣品:用減量稱重法對(duì)樣品進(jìn)行稱重,建議按比例每1mg組織加20µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質(zhì)含量變異而產(chǎn)生的誤差。加入裂解液后可用研缽對(duì)樣品進(jìn)行研磨,而后將研磨液轉(zhuǎn)移到新的離心管中,室溫靜置10分鐘。

 

適用范圍:

適用于動(dòng)物實(shí)體組織、培養(yǎng)細(xì)胞、油料植物組織、固態(tài)食品組織、高濃度油料樣品中甘油三酯含量的測(cè)定。

 

組織甘油三脂檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介

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