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植物淀粉含量檢測(cè)試劑盒淀粉該如何提取!
更新時(shí)間:2018-10-31   點(diǎn)擊次數(shù):2114次

植物淀粉含量檢測(cè)試劑盒淀粉該如何提取!

 

淀粉是植物中糖的主要儲(chǔ)存形式,其含量測(cè)定對(duì)于評(píng)價(jià)食品營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和調(diào)查植物體內(nèi)糖代謝都有重要意義。

 

測(cè)定原理:
利用80%乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開,進(jìn)一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖,
采用蒽酮比色法測(cè)定葡萄糖含量,即可計(jì)算淀粉含量。

 

需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰、濃
硫酸(不允許快遞)和蒸餾水。

 

試劑的組成和配制:
試劑一:液體100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體105mL×1 瓶,4℃保存;
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存;

 

淀粉提取:
1、 稱取0.1~0.2g 樣本(建議稱取約0.1g 樣本)于研缽中研碎,加入1mL 試劑一,充分勻
漿后轉(zhuǎn)移到EP 管中,80℃水浴提取30min,3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀。
2、 沉淀中加入0.5mL 蒸餾水,放入95℃水浴中糊化15min(蓋緊,以防止水分散失)。
3、 冷卻后,加入0.35mL 試劑二,25℃常溫提取15min,振蕩3-5 次。
4、 加入0.85mL 蒸餾水,混勻,3000g,25℃離心10min,取上清液待測(cè)。

 

測(cè)定步驟:
1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至620nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 調(diào)節(jié)水浴鍋至95 度。
3、工作液的配制:臨用前在試劑三中加入3.75mL 蒸餾水后,緩慢加入21.25mL 濃硫酸,
不斷攪拌,充分溶解,待用;用不完的試劑4℃保存一周;
4、樣本測(cè)定:取50μL樣本和250μL工作液至EP管中,95度水浴10 min(蓋緊,防止水分散
失),自然冷卻至室溫,取200uL至微量石英比色皿或96孔板中,在620 nm 波長(zhǎng)下記錄測(cè)
定吸光度值A(chǔ)。

 

注意:

由于工作液具有強(qiáng)腐蝕性,請(qǐng)謹(jǐn)慎操作。

若吸光值大于1,請(qǐng)將樣本用提取液稀釋后再測(cè)定,計(jì)算公式中乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
提取液的配置:0.35mL 試劑二+1.35mL 水。用多少按照此比例配多少。

 

植物淀粉含量檢測(cè)試劑盒淀粉該如何提取!

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